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簡述Wondasil色譜柱保存方法和峰形異常原因

更新時間:2022-01-10  |  點擊率:938
  對于色譜柱的知識科普,你可以來參觀一下,讓你之后更好的使用它。
  Wondasil色譜柱內(nèi)徑知識說明:柱效率與柱半徑平方成反比,內(nèi)徑越小柱效越高,但內(nèi)徑越大,柱容量也增加,允許進樣量就越多。當(dāng)進樣量超過柱容量時,則因柱內(nèi)每塊理論板內(nèi)不能建立真正的平衡,將會導(dǎo)致色譜蜂畸變,柱分辨率降低,重現(xiàn)性不好。因此對于復(fù)雜樣品需要精確分離,必須使用小內(nèi)徑柱子。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物,為了增加樣品容量就必須使用內(nèi)徑大的柱子,目前實驗室使用常見的柱子內(nèi)徑一般是4.6mm。

  Wondasil色譜柱保存方法和峰形異常原因:
  保存:短期保存(隔夜或隔周末)用所用的流動相(不含緩沖鹽)保存為佳,以盡量減少下次使用的平衡時間。一般只建議在長期保存反相柱的時候用純醇或乙腈,使用80%左右有機相保存也屬好的選擇,且足以避免長菌。強烈建議在柱身上貼標(biāo)簽標(biāo)明保存溶劑。離子交換柱和水性凝膠柱等適合保存在水溶液中的色譜柱,可加0.05%化鈉溶液防止K菌。正相柱無論是短期還足長期,都推薦保存住所用流動相巾。
  要長時間保存,必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲存于嚴(yán)格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲存于水(含防腐劑化鈉或柳硫汞)中,并將購買新島津液相色譜柱時附送的堵頭堵上。特殊類型色譜柱的儲存,需參考色譜柱說明書,使用島津液相色譜柱廠商推薦的溶劑。
  峰形異常:峰形對稱性的優(yōu)劣對峰面積和分離度有很大的影響,從而影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。先檢查樣品足否過載,由于樣品過載引起的峰形后拖不能通過改變色譜條件消除。如果發(fā)現(xiàn)過載,需降低進樣量(包括進樣體積或濃度),進樣量越小,峰形越好,例子如頭孢尼西鈉的測定。其次,硅醇基次級保留引起部分峰拖尾。這種情況發(fā)生,選擇高密鍵合和*的雙蜂尾工藝的色譜柱能改善峰形。另外,溶解樣品的溶劑洗脫能力比流動相強會發(fā)生峰前延,所以樣品選用流動相溶解。
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